一种氨基甲酸乙酯水解酶突变体及其应用
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摘要
本发明公开了一种氨基甲酸乙酯水解酶突变体及其应用。所述氨基甲酸乙酯水解酶突变体由根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)d3的酰胺酶基因经过突变得到，野生型酰胺酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述氨基甲酸乙酯水解酶突变体由野生型酰胺酶经过R94P、I97L、S177C或G195A中的至少一个位点突变所得。发明筛选得到来自Agrobacterium tumefaciens d3的酰胺酶，在乙醇浓度0％‑20％之间，剩余酶活高于90％，高于25％之后酶活下降迅速，该酶对低浓度乙醇表现出极好的耐受性。通过半理性改造，构建了一个21个点突变的突变体库，并从中筛选得到4个酶活有提高的突变位点(R94P、I97L、S177C、G195A)，组合突变株I97L/G195A酶活提高了5.2倍，由原来的395U/L提高到2442U/L。
基本信息
专利标题 ：
一种氨基甲酸乙酯水解酶突变体及其应用
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN112342209A
申请号 ：
CN202011348306.8
公开（公告）日 ：
2021-02-09
申请日 ：
2020-11-26
授权号 ：
CN112342209B
授权日 ：
2022-06-14
发明人 ：
吴绵斌康婷婷杨祎林建平杨立荣
申请人 ：
浙江大学
申请人地址 ：
浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
代理机构 ：
杭州天勤知识产权代理有限公司
代理人 ：
沈金龙
优先权 ：
CN202011348306.8
主分类号 ：
C12N9/80
IPC分类号 ：
C12N9/80 C12N15/55 C12P7/06
相关图片
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N9/00
酶，如连接酶；酶原；其组合物；制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法
C12N9/14
水解酶
C12N9/78
作用在除肽键外的碳-氮键上
C12N9/80
作用在有线型酰胺中的酰胺键上
法律状态
2022-06-14 ：
授权
2021-03-02 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 9/80
申请日 : 20201126
申请日 : 20201126
2021-02-09 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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1、
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