本发明公开了一种利用酵母生产β－环糊精的方法，即利用基因工程技术将环糊精糖基转移酶表达固定在酿酒酵母细胞表面，然后利用表面固定有环糊精糖基转移酶的酿酒酵母细胞发酵生产β－环糊精，在分离纯化产品β－环糊精时，只需要离心去除菌体细胞和剩余底物，然后浓缩反应上清液就可得到相当纯度的β－环糊精产品。本发明的方法在固定化过程中酶活性不下降，制得的固定化酶稳定性高，可以重复利用，省去了纯化步骤；而且在生产环糊精的同时酒精的产生以及酵母对葡萄糖和麦芽糖的消耗都促进了环糊精的产生，提高了产率。本发明中所使用的酿酒酵母作为一种已经被广泛应用于食品生产的微生物，所生产的β－环糊精具有不容置疑的安全性。