本发明提供一种自发光生物芯片及其制作和检测方法，解决了制作或检测须添标记物带来的制作或检测工艺复杂、技术要求高，成本昂贵、质量难于保证等问题。技术方案是在载体硅片上开有10－50纳米的纳米孔，其可自然形成发射光，在纳米孔上固着具有特异识别功能的活性物质，纳米孔仍具有发射光；当与被测物接触时，其光强变化，以此检测被测物的浓度。所述活性物质是CK－MB抗体、β－内酰胺酶或外源凝集素。运用与被测物反应时其光强变化直接检测浓度，使检测便捷、适于个人和现场的快速检测；与现有技术相比，成本低廉，工艺简单，操作简便，质量易控，便于工业化实施推广。使用上没有特别的约束，可广泛用于工业、医药、环保及食品等多种领域。